基因敲入位点怎么选？普通KI还是Rosa26、H11？

KI小鼠与Rosa26/H11 KI小鼠区别

定义及核心特点

普通 KI 小鼠是将外源基因插入基因组的任意位点，可能是随机整合，也可能依赖简单同源重组定位。

Rosa26 KI 小鼠则是将外源基因插入到小鼠 6 号染色体上的 Rosa26 位点，这是一个高度保守的非编码基因位点，在所有细胞类型和发育阶段均有广泛表达，其启动子区域具有高度的转录活性，内含子包含独特的转录起始位点（ATG），可使外源基因稳定、可重复地表达。

Rosa26特点：

1）高度保守的非编码区域，插入后不影响细胞功能。

2）染色质结构松散，支持外源基因广谱性表达（如全身性表达工具鼠模型）。

H11 KI 小鼠是将外源基因插入到小鼠 11 号染色体的 H11 位点，该位点位于免疫球蛋白 κ 轻链基因座附近，染色质天然开放，兼容多种启动子，支持外源基因在多种组织中高表达，且免疫原性低，适合异源蛋白表达。

H11特点：1）位于免疫球蛋白κ轻链基因座附近，天然开放且兼容多种启动子。2）支持外源基因在多种组织（如肌肉、肝脏）中高表达。

应用场景

全局表达：Rosa26 KI 小鼠和 H11 KI 小鼠都能实现全身表达。例如，Rosa26 KI 小鼠可以利用其广谱表达特性，让外源基因在动物机体所有组织和细胞中表达，像表达荧光蛋白标记所有细胞；H11 KI 小鼠可用于人源化抗体的全身表达。而普通 KI 小鼠由于插入位点不确定，表达可能不稳定。

条件性敲入：Rosa26 KI 小鼠可与 Cre 系统联用，通过 cre-loxp 重组系统实现对基因表达的时间和细胞类型特异性控制，灵活地进行条件性基因操作。H11 KI 小鼠通常不用于条件性敲入，普通 KI 若要实现条件性敲入，还需额外设计 LoxP 位点。

高表达需求：H11 KI 小鼠因免疫原性低、位点优势明显，适合蛋白过表达；Rosa26 KI 小鼠可能受内源性调控元件限制，难以满足超高表达需求；普通 KI 尽管也能实现高表达，但需优化启动子等元件来提升表达水平。

避免插入突变风险：Rosa26 和 H11 KI 小鼠的基因间区均无内源基因，插入外源基因时不会破坏宿主关键功能基因，降低插入突变风险。而普通 KI 由于随机插入，存在破坏基因组内基因的风险。

如何选择？

如何选择需根据实际实验需求进行选择，可根据以下表格选择。

参考资料：
[1]https://www.nature.com/articles/nn.2467[2]https://www.nature.com/articles/ng0199_70

[3]https://mp.weixin.qq.com/s/-NnpI6_p8Adn4FiqZN9r0g[4]https://mp.weixin.qq.com/s/XSRoWsaSGSl1ByM4DR4XfA

特别声明：本文来自明迅生物公众号，欢迎个人转发至朋友圈，谢绝媒体或机构未经授权以任何形式转载至其他平台。转载授权请在公众号后台留言联系我们。其他合作需求，请联系sales@mingceler.com。

免责声明：部分素材源于网络，如有侵权，联系删除，本文仅作信息交流之目的，文中观点不代表明迅生物立场，亦不代表明迅生物支持或反对文中观点。